Methylation-specipc PCR (MSP) Kit

Kîta tespîtkirina PCR-ya taybetî ya methylasyonê.

Methylation-specific PCR (MSP) Kit bi taybetî ji bo xerîdarên ku taybetmendiyên methylasyona DNA-ya genomîkî ji hêla PCR-ê ve dixwînin ve hatî çêkirin, ku tê de MSP DNA Polymerase polimerazek thermostable e ku bi antîpîdeyan hatî guheztin, û 10-MSP PCR Buffer tamponek PCR ye ku bi taybetî ji bo Berteka MSP. Ew bi TIANGEN DNA Bisulfite Conversion Kit (4992447) re hevaheng e.

Pisîk. Na Packing Size
4992759 50 amadekirin

Berfirehiya Hilberê

Workflow

Nimûneyên Ceribandî

FAQ

Tags Product

Taybetmendî

■ Berhem xwedî avantajên bilezbûn, sade, hesasiyeta bilind, taybetmendiyek xurt û aramiya baş e.

Specification

Awa: MSP DNA Polymerase
Pablon: <500 ng
Serîlêdan: Ew ji bo methylasyona taybetî ya PCR (MSP) guncan e ku meriv taybetmendiyên methylasyona DNA -ya genomîkî analîz bike

Hemî hilber dikarin ji bo ODM/OEM -ê bêne xweş kirin. Ji bo hûragahiyan,Ji kerema xwe Xizmeta Taybetkirî (ODM/OEM) bikirtînin


  • Pêşî:
  • Piştî:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    1. Kit-Methylation-Specific PCR (MSP) Kit ji bo zêdekirina perçeya 400 bp bi karanîna bisulfîta DNA-ya genomîkî wekî şablon bi pergala reaksiyonê ya 20 μl hate bikar anîn.

    Experimental Exampl

    2. Danîna çerxa berteka PCR

    Experimental Exampl

     

    Experimental Examples 1: Nimûneyên ku ji hêla Pargîdaniya A ve têne rêve kirin;
    2: Nimûneyên ku ji hêla Pargîdaniya B ve têne pêvajoy kirin;
    3: TIANGEN mînaka dermankirî 4: NTC; M: D2000
    Experimental Examples 1-6:
    6 dubare dike;
    7: Pêşkêşker Nimûneyek pêvajoykirî;
    8: NTC; Bio2-F/R û P16- Me-F/R: Du destpêkên tespîtkirinê.
    Q: Zencîreyên zêdekirinê tune

    A-1 pablon

    ■ Di şablonê de qirêjiyên proteînê an astengkerên Taq, û hwd hene. —— lateablona DNA paqij bikin, qirêjiyên proteînê rakin an DNA şablonê bi kîtên paqijkirinê derxînin.

    ■ Denaturkirina şablonê ne temam e —— Bi guncanî germahiya denaturasyonê zêde bike û dema denaturationê dirêj bike.

    Deg Xerabkirina şablonê —— theablon ji nû ve amade bikin.

    A-2 Destpêk

    Quality Kalîteya nebaş a destpêkan-—Pêşînokê ji nû ve sentez bikin.

    Deg Hilweşîna seretayî —— Ji bo parastinê serekên berhevkirî yên bilind bihejmêrin. Ji cemidandin û cemidandina pirjimar an jî dirêj-dirêj 4 ° C sarincokê biparêzin.

    Design Sêwirana ne rast a destpêkan (mînak. Dirêjahiya destpêkerê têrê nake, dimer di navbera destpêkan de çêdibe, hwd.)

    A-3 Mg2+lisersekinî

    ■ Mg2+ konsantrasyon pir kêm e - —Bi rast Mg zêde bikin2+ konsantrasyon: Mg Optimize bikin2+ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn2+ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

    A-4 Germahiya Annealing

    Temperature Germahiya bilind alandinê bandorê li girêdana destpêk û şablonê dike. —— Germahiya anînê kêm bikin û bi germahiyek 2 ° C şertê xweş bikin.

    A-5 Dema dirêjkirinê

    Extension Demjimêra dirêjkirina kurt —— Dema dirêjkirinê zêde bikin.

    Pirs: Erênî derewîn

    Fenomen: Nimûneyên neyînî jî bendên rêzika hedef nîşan didin.

    A-1 Qirêjiya PCR

    Cont Qirêjiya rêzika hedef an hilberên zêdekirinê —— Bi baldarî nimûneya ku tê de rêzika armancê di mînaka neyînî de tê pîp kirin an wan ji lûleya santrîfûjê dernexe. Pêdivî ye ku reaktîv an alav werin autoklav kirin da ku asîdên nukleîk ên heyî ji holê rakin, û divê hebûna enfeksiyonê bi ceribandinên kontrola neyînî were destnîşan kirin.

    Cont Qirêjiya reaksiyonê —— Reagentan hilînin û li germahiyek nizm hilînin.

    A-2 Serokwezîrr

    ■ Mg2+ konsantrasyon pir kêm e - —Bi rast Mg zêde bikin2+ konsantrasyon: Mg Optimize bikin2+ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn2+ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

    Design Sêwirana seretayî ya nerast, û rêzika armanc bi rêzika ne-hedef re homolojî heye. —— Serenavên ji nû ve sêwirandin.

    Q: Zêdekirina ne-taybetî

    Fenomena: Zencîreyên bihêzkirina PCR-ê bi mezinahiya ku tê hêvî kirin re nakok in, an mezin an piçûk, an carinan hem bandên zêdebûnê yên taybetî û hem jî bandên bihêzbûnê yên ne-taybetî çêdibin.

    A-1 Destpêk

    . Taybetmendiya seretayî ya belengaz

    —— Serenavê ji nû ve sêwirandin.

    Concentration Berhevkirina seretayî pir zêde ye ——Bi rast germahiya denaturasyonê zêde bikin û dema denaturationê dirêj bikin.

    A-2 Mg2+ lisersekinî

    ■ The Mg2+ konsantrasyon pir zêde ye —— Bi rast Mîqdara Mg2+ kêm bikin: Mg xweş bikin2+ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn2+ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

    A-3 Thermostable polymerase

    Amount Hejmara zêde ya enzîmê —— Mêjera enzîmê bi rêkûpêk bi navberên 0.5 U kêm bikin.

    A-4 Germahiya Annealing

    Temperature Germahiya germkirinê pir nizm e —— Bi guncanî germahiya germkirinê zêde bikin an jî rêbaza vekirina du-qonaxî bicîh bînin

    Çerxên A-5 PCR

    Many Zêde dewreyên PCR —— Hejmara dewreyên PCR kêm bikin.

    Q: Bendikên pêçandî an şilandî

    A-1 Destpêk—— Taybetmendiya belengaz —— Destpêkê ji nû ve dîzayn bikin, cîh û dirêjahiya pêşîn biguhezînin ku taybetmendiya wê zêde bikin; an PCR -a hêlînkirî pêk bînin.

    A-2 Temablon DNA

    —— tempablon ne paqij e —— lateablon paqij bikin an DNA bi kîtên paqijkirinê derxînin.

    A-3 Mg2+ lisersekinî

    ——Mg2+ konsantrasyon pir zêde ye —— Bi rast Mg kêm bikin2+ konsantrasyon: Mg Optimize bikin2+ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn2+ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

    A-4 dNTP

    —— Kêmasiya dNTP -ê pir zêde ye —— Kêmasiya dNTP -ê bi guncan kêm bikin

    A-5 Germahiya germkirinê

    —— Germahiya vezelînê pir nizm —— Bi awayekî guncaw germahiya vezelînê zêde bikin

    Çerxên A-6

    —— Pir dewr —— Hejmara dewrê xweş bike

    Q: Di pergala reaksiyona PCR ya 50 μl de divê çiqas DNA şablon were zêdekirin?
    ytry
    Q: Meriv çawa perçeyên dirêj dirêj dike?

    Gava yekem ev e ku hûn polîmeraza guncan hilbijêrin. Polîmeraza Taqê ya birêkûpêk ji ber nebûna çalakiya 3'-5 'exonukleazê nikare rast bike, û hevnegirî dê bandorkeriya dirêjkirina perçeyan pir kêm bike. Ji ber vê yekê, polîmeraza birêkûpêk a Taq nikare perçeyên armancê yên ji 5 kb mezintir bi bandor zêde bike. Polîmeraza Taq a bi guheztina taybetî an polimeraza din a dilsoziya bilind divê were hilbijartin da ku karîgeriya dirêjkirinê baştir bike û hewcedariyên amplifikasyona perçeyek dirêj bicîh bîne. Digel vê yekê, zêdekirina perçeyên dirêj jî pêdivî bi sererastkirina sêwirana seretayî, dema denaturation, dema dirêjkirinê, pH tampon, hwd. Ji bo ku pêşî li zirara şablonê were girtin, divê demjimêra guherînê di 94 ° C de ji bo çerxekê 30 sec an kêmtir were kêm kirin, û dema ku germahî heya 94 ° C berî zexmkirinê divê ji 1 min kêmtir be. Wekî din, sazkirina germahiya dirêjkirinê li dor 68 ° C û sêwirandina dema dirêjkirinê li gorî rêjeya 1 kb/min dikare amplifikasyona bi bandor a perçeyên dirêj misoger bike.

    Q: Meriv çawa dilsoziya amplifikasyona PCR baştir dike?

    Rêjeya çewtiya zêdebûna PCR dikare bi karanîna polimerazên cihêreng ên DNA -yê bi dilsoziyek bilind were kêm kirin. Di nav hemî polimerazên Taq DNA yên ku heya nuha hatine dîtin de, enzima Pfu rêjeya xeletiya herî kêm û dilsoziya herî zêde heye (li tabloya pêvekirî binêre). Digel vebijarka enzîmê, lêkolîner dikarin bi xweşkirina şert û mercên reaksiyonê, rêjeya mutasyona PCR jî kêm bikin, di nav de xweşbînkirina berhevoka tampon, giraniya polîmeraza thermostable û xweşkirina jimara PCR.

    Peyama xwe li vir binivîsin û ji me re bişînin