Buff Tamponên xweşbînkirî yên ji bo nimûneyên nebatê pêvajoyê hêsantir dike.
■ Yekane DNase I qirêjiya DNA -ya genomî kêm dike.
Column Stûna filtrasyonê ya bêhempa CS qirêjiyên din radike.
R RNA-ya paqij-paqij a amade-bikar-ê ji bo serlêdanên jêrîn ên hestiyar maqûl e.
■ Ne derxistina fenol/kloroform, ne barana LiCl û etanolê, û ne jî santrîfuzasyona gradên CsCl hewce ye, ku pêvajoyê ewledar û pêbawer dike.
■ RT-PCR.
■ Paqijkirina Bakur, Xala Xalê.
■ Real-Time PCR.
Analysis Analîza çîpê.
Reen Nîşana PolyA, wergera in vitro, klonkirina molekulî.
Ger mînak di metabolîzma duyemîn de dewlemend be, Buffer HL ku ji hêla TIANGEN ve hatî peyda kirin dikare were bikar anîn da ku karîgeriya paqijkirina herî zêde bi dest bixe.
Hemî hilber dikarin ji bo ODM/OEM -ê bêne xweş kirin. Ji bo hûragahiyan,Ji kerema xwe Xizmeta Taybetkirî (ODM/OEM) bikirtînin
Materyal: 80 mg pelên Atenia cordifolia Rêbaz: RNA -ya giştî ya pelên Atenia cordifolia bi karanîna RNAprep Pure Plant Kit ve hate veqetandin. Encam: Ji kerema xwe wêneya electrophoresis gel agarose ya jorîn bibînin. 2-4 μl ji 100 μl eluates per lane bar kirin. Elektroforez li wir hate kirin |
|
Hilbera RNA -ya texmînkirî ya nimûneyên cihêreng |
A-1 Hucrekirin an homojenîzasyon ne bes e
---- Bikaranîna nimûneyê kêm bikin, mêjûya tîrêjê zêde bikin, homojenîzasyon û dema lîzê zêde bikin.
A-2 Hejmara nimûneyê pir mezin e
---- Mêjeya nimûneya ku tê bikar anîn kêm bikin an mêjûya tîrêjê zêde bikin.
A-1 Lîz an jî homojenîzasyona şaneyê têr nake
---- Bikaranîna nimûneyê kêm bikin, mêjûya tîrêjê zêde bikin, homojenîzasyon û dema lîzê zêde bikin.
A-2 Hejmara nimûneyê pir mezin e
---- Ji kerema xwe serî li kapasîteya pêvajoyê ya herî zêde bidin.
ARN-A-3 bi tevahî ji stûnê nayê derxistin
---- Piştî ku hûn ava RNase-Zêde lê zêde bikin, çend hûrdeman berî santrîfuzkirinê bihêlin.
A-4 Etanol di eluentê de
---- Piştî şuştinê, dîsa santrîfûj bikin û heta ku ji dest tê tampona şuştinê jê bikin.
Navgîniya çanda A-5 Cell bi tevahî nayê rakirin
---- Dema ku hucreyan berhev dikin, ji kerema xwe heya ku ji dest tê çanda navîn derxînin.
A-6 Hucreyên ku di RNAstore de têne hilanîn bi bandorker nayên santrîfûj kirin
---- Tîrbûna RNAstore ji navgîniya çanda navîn a hucreyê mezintir e; ji ber vê yekê divê hêza navendparêziyê bê zêdekirin. Tête pêşniyar kirin ku li 3000x g bê centrifûge kirin.
A-7 Di nimûneyê de naverok û pirbûna ARN-ya kêm
---- Nimûneyek erênî bikar bînin da ku hûn diyar bikin ka berhema kêm ji hêla nimûneyê ve hatî çêkirin.
A-1 Maddî ne teze ye
---- Pêdivî ye ku destmalên nû tavilê di nîtrojenê şil de bêne hilanîn an tavilê têkevin nav reagenta RNAstore da ku bandora derxistinê misoger bike.
A-2 Hejmara nimûneyê pir mezin e
---- Hejmara nimûneyê kêm bikin.
A-3 RNase contamination
---- Tevî ku tampona ku di kîtekê de tê peyda kirin RNase nagire, ew hêsan e ku meriv di pêvajoya derxistinê de RNase qirêj bike û divê bi baldarî were desteser kirin.
Qirêjiya A-4 Electrophoresis
---- Tampona electrophoresis biguhezînin û piştrast bikin ku xerç û Barkirina Buffer ji vegirtina RNase azad in.
A-5 Ji bo elektroforezê pir barkirin
---- Mûçeya barkirina nimûneyê kêm bikin, barkirina her bîrê divê ji 2 μg derbas neke.
Rêjeya A-1 Nimûne pir mezin e
---- Hejmara nimûneyê kêm bikin.
A-2 Hin mînak xwedî naveroka DNA-ya bilind in û dikarin bi DNase bêne derman kirin.
---- Dermankirina DNase ya RNase-Azad bi çareseriya RNA ya hatî bidestxistin re bikin, û RNA dikare rasterast ji bo ceribandinên paşîn ên piştî dermankirinê were bikar anîn, an jî ji hêla kîtên paqijkirina RNA ve bêtir were paqij kirin.
Ji bo şûşeyên cam, 4 demjimêran li 150 ° C tê pijandin. Ji bo konteynirên plastîk, di 0.5 M NaOH de 10 hûrdeman tê şûştin, dûv re bi ava RNase-ya bêkêmasî tê şuştin û dûvre jî steril dibin da ku RNase bi tevahî rakin. Reagent an çareseriyên ku di ezmûnê de têne bikar anîn, nemaze av, pêdivî ye ku ji RNase azad bin. Ji bo hemî amadekariyên reagent ava bê RNase bikar bînin (avê li şûşeyek şûşa paqij zêde bikin, DEPC li berhevoka dawîn a 0.1% (V/V) zêde bikin, şevekê bihejînin û otoklav bikin).
Ji damezrandina xwe ve, kargeha me bi rêzgirtina prensîbê re hilberên çîna yekem ên cîhanê pêşve xist
kalîteya yekem. Berhemên me di pîşesaziyê de navûdengê hêja û di nav xerîdarên nû û kevn de pêbaweriyek hêja wergirtiye ..