Kîta DNAya Genomîk a Nebatê Super

A-1 Di nimûneya destpêkê de berhevoka kêm a şaneyan an vîrusê-Zêdekirina şaneya an vîrusan.

A-2 Lîzbûna nimûneyan têr nake-Nimûne bi tampona lîzê re bi tevahî nehatine tevlihev kirin. Tête pêşniyar kirin ku 1-2 caran bi pêl-vortexing bi tevahî were tevlihev kirin. -Lîzê hucreyê têrê nake ji ber kêmbûna çalakiya proteînase K. Tête pêşniyar kirin ku tevn li perçeyên piçûk were birrîn û dema serşokê were dirêj kirin da ku hemî bermayiyên di lîzeyê de werin rakirin.

A-3 Çêkirina ADNyê têr nake. -Berî ku lysate li stûna spînê were veguheztin, li şûna 100% etanolê etanol an kêm-sedî nehate zêdekirin.

A-4 Nirxa pH ya tampona elûsyonê pir kêm e. -pH di navbera 8.0-8.3 de biguhezînin.

Di eluentê de etanolê mayî.

- Di eluentê de tamponek şuştina mayî heye. Etanol dikare bi santrîfûjkirina stûna spînê 3-5 deqeyan were rakirin, û dûv re li germahiya jûreyê an inkubatorê 50 ℃ ji bo 1-2 hûrdeman were danîn.

A-1 Mînak ne teze ye. - DNA -ya nimûneyek erênî wekî kontrolê derxînin da ku hûn diyar bikin ka DNAya di mînakê de xirab bûye.

A-2 Pêş-dermankirina nerast. - Sedema ziravbûna zêde ya nîtrojenê ya avî, vegera tîrêjê, an mîqyasa pir mezin a nimûneyê.

Pêdivî ye ku pêşdibistan ji bo nimûneyên cûda cûda bibin. Ji bo nimûneyên nebatan, pê ewle bine ku nîtrojenê şil bi tevahî hûr bikin. Ji bo nimûneyên heywanan, di nîtrojenê şil de homojen bikin an bi tevahî bişelînin. Ji bo nimûneyên bi dîwarên hucreyê yên ku şikandina wan dijwar e, wek bakteriyên G+ û hevîrtirş, tê pêşniyar kirin ku ji bo şikandina dîwarên hucreyê, lîzozîm, lîtîkaz an rêbazên mekanîkî werin bikar anîn.

4992201/4992202 Kitêba DNA-ya Genomîkî ya Nebatî rêgezek li ser stûnê dipejirîne ku ji bo derxistinê kloroform hewce dike. Ew bi taybetî ji bo nimûneyên nebatê yên cihêreng, û hem jî toza hişk a nebatê maqûl e. Hi-DNAsecure Plant Kit di heman demê de li ser stûnê ye jî, lê bêyî hewcedariya derxistina fenol/kloroformê, ew ewledar û ne-jehrî dike. Ew ji bo nebatên bi polîsakkarîd û naveroka polîfenolê pir maqûl e. 4992709/4992710 DNAquick Plant System rêbazek li ser şilek dipejirîne. Derxistina fenol/kloroform jî ne hewce ye. Pêvajoya paqijkirinê hêsan e û bilez e û ji bo mîqdarên destpêka nimûneyê tixûb tune, ji ber vê yekê bikarhêner dikarin li gorî hewcedariyên ceribandinê mîqyarê bi zexmî rast bikin. Mezinahiya mezin a perçeyên gDNA -yê bi hilberîna bilind ve têne wergirtin.

DNA -ya genomîk ji cûrbecûr nimûneyên xwîna tevahiya mirovan ji hêla TIANamp Blood DNA Kit ve hatî derxistin. Encam wiha ne. Encam tenê wekî referans têne navnîş kirin, encamên derxistina rastîn bi mercên mînakan ve girêdayî ye.

Rakirina xwîna DNA -ya xwînê dikare bi karanîna reagentên ku di van her du kîtan de têne peyda kirin bi hêsanî protokolê biguhezîne talîmata taybetî ya ji bo derxistina DNA ya xwînê. Kopiya nerm a protokola derxistina DNA ya xwînê dikare li gorî daxwazê ​​were weşandin.

Nimûneya teze bi 1 ml PBS, xwêya normal an tampona TE rawestînin. Nimûneyê bi tevahî ji hêla homojenîzasyonek ve homojen bikin û bi santrîfûjkirinê bermayiyê li binê lûlekê kom bikin. Avêtina avêtinê bavêjin, û bi 200 μl tampon GA rejînê ji nû ve bidin sekinandin. Paqijkirina DNA ya jêrîn dikare li gorî rêwerzan were kirin.

Ji bo paqijkirina gDNA di nimûneyên plazma, serum û şileya laş de, TIANamp Micro DNA Kit tê pêşniyar kirin. Ji bo paqijkirina gDNA vîrusê ji nimûneyên serum/plazmayê, Kit TNAamp Virus DNA/RNA Kit tê pêşniyar kirin. Ji bo paqijkirina gDNA ya bakterî ji serum û nimûneyên plazmayê, TIANamp Bacteria DNA Kit tê pêşniyar kirin (divê lîzozîm ji bo bakteriya erênî were nav kirin). Ji bo nimûneyên şuştinê, Hi-Swab DNA Kit û TIANamp Bacteria DNA Kit têne pêşniyar kirin.

DNAsecure Plant Kit an DNAquick Plant System ji bo derxistina genoma mîkrobat têne pêşniyar kirin. Ji bo derxistina genoma hevîrtirşkê, TIANamp Yeast DNA Kit tê pêşniyar kirin (divê lîtîkaz bixwe were amadekirin).