Kîta Derxistina & Zêdebûna GMOyê

Bi taybetî ji bo derxistina GMO -yê û tespîtkirina PCR -ya transgenîk maqûl e.

Kitêra Hilberîn & Amplifikasyonê ya GMO -yê bi taybetî ji bo tespîtkirina PCR -ê ya hilberên GMO -yê hatî pêşve xistin. Tampona lîzê ya bêhempa ya ku di Beşa A ya kîtê de tê de heye dikare bi taybetî tevnên hilberên sereke - genim, ceh, birinc, pembû û soya lîse bike, da ku pêkhateyên têkildar ên wekî asîdên nukleîk û proteînan berde. Derxistina fenol/kloroform bi RNase-ya taybetî re dikare DNA-ya genomîkî ya bi paqijiya bilind bêyî qirêjiyên wekî RNA, proteîn û iyonên metal paqij bike. DNA -ya paqijkirî dikare di tespîtkirina PCR -ya paşîn de were sepandin. Beşa B ya kîtekê pergalek reaksiyonê ya PCR-ya hêsan a du-hêmanî ye ku 2 × GMO PCR Buffer û GMO DNA Polymerase tê de heye. GMO DNA Polymerase polimerazek thermostable e ku bi antîpîdeyan hatî guheztin. 2 × GMO PCR Buffer pêkhateyên cihêreng ên wekî MgCl hene₂, dNTPs, stabîlîzatorê reaksiyona PCR, xweşbînker û bihêzker di hêjahiya 2 × GMO de. Ew xwedî avantajên xebatek bilez û hêsan, hesasiyeta bilind, taybetmendiya bihêz, aramiya baş, hwd. Ew dikare ji bo tespîtkirina PCR transgenîk a çandiniya GMO -yê bi kombînasyona bi Part A re were bikar anîn.

Pisîk. Na	Packing Size
4992905	200 rxn

E -nameyê ji me re bişînin

Berfirehiya Hilberê

Mînaka Ceribandinê

FAQ

Tags Product

Taybetmendî

Applic Bikarhêneriya Berfireh: Ev kît dikare ji pênc berhemên mezin ên GMO -yê DNA -ya genomîkî ya hêja derxe.
■ Hêsan û bilez: Derxistina GMO ya genomîkî ya çandina GMO dikare di nav 2 demjimêran de were qedandin. Ne hewceyê santrîfûjên sarinckirî yên mezin, hewcedariyên kêm ji bo alav û amûran. Ji bo derxistina zû ya DNA -ya genomîkî ya berhemên GMO -yê di hemî astên saziyên lêkolînê de maqûl e.
Efficiency Kêrhatîbûn û taybetmendiya bilind: Tamponek bêhempa ya polîmeraza Taq a bi antîpotî hatî guheztin, amplifikasyona polîmeraza bikêr misoger dike, ku ji polîmeraza Taq a normal taybettir e.

Applications

Kît dikare DNAya genomîkî ya qalîteya bilind ji berhemên mezin ên GMO yên wekî genim, ceh, birinc, pembû û soya derxe, û tespîta PCR -ya transgenîkî li ser berhemên GMO -yê bike.

Hemî hilber dikarin ji bo ODM/OEM -ê bêne xweş kirin. Ji bo hûragahiyan,Ji kerema xwe Xizmeta Taybetkirî (ODM/OEM) bikirtînin

Pêşî: FastKing One Step RT-qPCR Kit (Lêpirsîn)

Piştî: TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

	Derxistina DNA ya genomîk Derxistina DNA ya genomîk bi rêzê ve li ser 100 mg pelên birinc, nîsk, soya, pembû û genim hate kirin. Ezmûn du caran hat dubare kirin. 3 μl DNA ji tevahî 100 μl ronakbiran li her rêyekê bar kir. Pîvana gel agarose%2 bû. Elektroforez di binê 6 V/cm de 20 hûrdem hate kirin. D15000: Nîşana DNA ya TIANGEN D15000.
	PCR Detection DNAya genomîkî ya birinc, nîsk, soya, pembû û genim, bi rêzê ve hate zêdekirin. Ezmûn du caran hat dubare kirin. 6 μl ji tevahî 20 μl pergala reaksiyonê per lane hate barkirin. Pîvana gel agarose%2 bû. Elektroforez di binê 6 V/cm de 20 hûrdem hate kirin. D15000: Nîşana DNA ya TIANGEN D15000.

Q: Zencîreyên zêdekirinê tune

A-1 pablon

■ Di şablonê de qirêjiyên proteînê an astengkerên Taq, û hwd hene. —— lateablona DNA paqij bikin, qirêjiyên proteînê rakin an DNA şablonê bi kîtên paqijkirinê derxînin.

■ Denaturkirina şablonê ne temam e —— Bi guncanî germahiya denaturasyonê zêde bike û dema denaturationê dirêj bike.

Deg Xerabkirina şablonê —— theablon ji nû ve amade bikin.

A-2 Destpêk

Quality Kalîteya nebaş a destpêkan-—Pêşînokê ji nû ve sentez bikin.

Deg Hilweşîna seretayî —— Ji bo parastinê serekên berhevkirî yên bilind bihejmêrin. Ji cemidandin û cemidandina pirjimar an jî dirêj-dirêj 4 ° C sarincokê biparêzin.

Design Sêwirana ne rast a destpêkan (mînak. Dirêjahiya destpêkerê têrê nake, dimer di navbera destpêkan de çêdibe, hwd.)

A-3 Mg²⁺lisersekinî

■ Mg²⁺ konsantrasyon pir kêm e - —Bi rast Mg zêde bikin²⁺konsantrasyon: Mg Optimize bikin²⁺ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn²⁺ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

A-4 Germahiya Annealing

Temperature Germahiya bilind alandinê bandorê li girêdana destpêk û şablonê dike. —— Germahiya anînê kêm bikin û bi germahiyek 2 ° C şertê xweş bikin.

A-5 Dema dirêjkirinê

Extension Demjimêra dirêjkirina kurt —— Dema dirêjkirinê zêde bikin.

Pirs: Erênî derewîn

Fenomen: Nimûneyên neyînî jî bendên rêzika hedef nîşan didin.

A-1 Qirêjiya PCR

Cont Qirêjiya rêzika hedef an hilberên zêdekirinê —— Bi baldarî nimûneya ku tê de rêzika armancê di mînaka neyînî de tê pîp kirin an wan ji lûleya santrîfûjê dernexe. Pêdivî ye ku reaktîv an alav werin autoklav kirin da ku asîdên nukleîk ên heyî ji holê rakin, û divê hebûna enfeksiyonê bi ceribandinên kontrola neyînî were destnîşan kirin.

Cont Qirêjiya reaksiyonê —— Reagentan hilînin û li germahiyek nizm hilînin.

A-2 Serokwezîrr

■ Mg²⁺ konsantrasyon pir kêm e - —Bi rast Mg zêde bikin²⁺ konsantrasyon: Mg Optimize bikin²⁺ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn²⁺ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

Design Sêwirana seretayî ya nerast, û rêzika armanc bi rêzika ne-hedef re homolojî heye. —— Serenavên ji nû ve sêwirandin.

Q: Zêdekirina ne-taybetî

Fenomena: Zencîreyên bihêzkirina PCR-ê bi mezinahiya ku tê hêvî kirin re nakok in, an mezin an piçûk, an carinan hem bandên zêdebûnê yên taybetî û hem jî bandên bihêzbûnê yên ne-taybetî çêdibin.

A-1 Destpêk

. Taybetmendiya seretayî ya belengaz

—— Serenavê ji nû ve sêwirandin.

Concentration Berhevkirina seretayî pir zêde ye ——Bi rast germahiya denaturasyonê zêde bikin û dema denaturationê dirêj bikin.

A-2 Mg²⁺ lisersekinî

■ The Mg²⁺ konsantrasyon pir zêde ye —— Bi rast Mîqdara Mg2+ kêm bikin: Mg xweş bikin²⁺ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn²⁺ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

A-3 Thermostable polymerase

Amount Hejmara zêde ya enzîmê —— Mêjera enzîmê bi rêkûpêk bi navberên 0.5 U kêm bikin.

A-4 Germahiya Annealing

Temperature Germahiya germkirinê pir nizm e —— Bi guncanî germahiya germkirinê zêde bikin an jî rêbaza vekirina du-qonaxî bicîh bînin

Çerxên A-5 PCR

Many Zêde dewreyên PCR —— Hejmara dewreyên PCR kêm bikin.

Q: Bendikên pêçandî an şilandî

A-1 Destpêk—— Taybetmendiya belengaz —— Destpêkê ji nû ve dîzayn bikin, cîh û dirêjahiya pêşîn biguhezînin ku taybetmendiya wê zêde bikin; an PCR -a hêlînkirî pêk bînin.

A-2 Temablon DNA

—— tempablon ne paqij e —— lateablon paqij bikin an DNA bi kîtên paqijkirinê derxînin.

A-3 Mg²⁺ lisersekinî

——Mg²⁺ konsantrasyon pir zêde ye —— Bi rast Mg kêm bikin²⁺ konsantrasyon: Mg Optimize bikin²⁺ kombûna bi rêze reaksiyonên ji 1 mM heta 3 mM bi navberek 0.5 mM ji bo diyarkirina Mg ya çêtirîn²⁺ berhevkirina ji bo her şablon û destpêk.

A-4 dNTP

—— Kêmasiya dNTP -ê pir zêde ye —— Kêmasiya dNTP -ê bi guncan kêm bikin

A-5 Germahiya germkirinê

—— Germahiya vezelînê pir nizm —— Bi awayekî guncaw germahiya vezelînê zêde bikin

Çerxên A-6

—— Pir dewr —— Hejmara dewrê xweş bike

Q: Di pergala reaksiyona PCR ya 50 μl de divê çiqas DNA şablon were zêdekirin?

Q: Meriv çawa perçeyên dirêj dirêj dike?

Gava yekem ev e ku hûn polîmeraza guncan hilbijêrin. Polîmeraza Taqê ya birêkûpêk ji ber nebûna çalakiya 3'-5 'exonukleazê nikare rast bike, û hevnegirî dê bandorkeriya dirêjkirina perçeyan pir kêm bike. Ji ber vê yekê, polîmeraza birêkûpêk a Taq nikare perçeyên armancê yên ji 5 kb mezintir bi bandor zêde bike. Polîmeraza Taq a bi guheztina taybetî an polimeraza din a dilsoziya bilind divê were hilbijartin da ku karîgeriya dirêjkirinê baştir bike û hewcedariyên amplifikasyona perçeyek dirêj bicîh bîne. Digel vê yekê, zêdekirina perçeyên dirêj jî pêdivî bi sererastkirina sêwirana seretayî, dema denaturation, dema dirêjkirinê, pH tampon, hwd. Ji bo ku pêşî li zirara şablonê were girtin, divê demjimêra guherînê di 94 ° C de ji bo çerxekê 30 sec an kêmtir were kêm kirin, û dema ku germahî heya 94 ° C berî zexmkirinê divê ji 1 min kêmtir be. Wekî din, sazkirina germahiya dirêjkirinê li dor 68 ° C û sêwirandina dema dirêjkirinê li gorî rêjeya 1 kb/min dikare amplifikasyona bi bandor a perçeyên dirêj misoger bike.

Q: Meriv çawa dilsoziya amplifikasyona PCR baştir dike?

Rêjeya çewtiya zêdebûna PCR dikare bi karanîna polimerazên cihêreng ên DNA -yê bi dilsoziyek bilind were kêm kirin. Di nav hemî polimerazên Taq DNA yên ku heya nuha hatine dîtin de, enzima Pfu rêjeya xeletiya herî kêm û dilsoziya herî zêde heye (li tabloya pêvekirî binêre). Digel vebijarka enzîmê, lêkolîner dikarin bi xweşkirina şert û mercên reaksiyonê, rêjeya mutasyona PCR jî kêm bikin, di nav de xweşbînkirina berhevoka tampon, giraniya polîmeraza thermostable û xweşkirina jimara PCR.

Peyama xwe li vir binivîsin û ji me re bişînin